植物血球凝集素(PHA)
植物血球凝集素Phytohemagglutinin(PHA),是以红肾豆为原料,以Nacl 液提取,用有机溶剂等分步析出。PHA是一种促细胞分裂原(mitogen)。
一、原理
在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类血淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有PHA的培养液培养,在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体,终止分裂中期的淋巴细胞,可得到所要的人体染色体图形。
二、使用方法
PHA培养液的配制
RPMI 1640或199 90%
小牛血清 10%
PHA 50-100 ug/ml
肝素(10u/ml) 2%
双抗(100u/ml) 选择
在无菌的条件下分装于10ml培养瓶内,每瓶5ml培养液,封口放入冷藏柜保存。
三、其作用与用途
PHA是一种促细胞分裂原(mitogen)。在体外能刺激小淋细胞转化成具有免疫活性的淋细胞,并促进其分裂。转化的淋巴细胞能分泌各种淋巴因子。
1、PHA对外周周血淋巴细胞的转化作用。
外周血淋巴细胞与PHA在体外一起培养,可使小淋巴细胞转化为淋巴母细胞。
2、PHA刺激淋巴细胞有丝分裂。
3、PHA能增强淋巴细胞玫瑰花环率,可用以判断机体细胞免疫功能。
4、PHA有促进腹腔巨噬细胞的吞噬作用。
5、PHA能诱导产生细胞移动抑制因子。
6、PHA能用于淋巴细胞亚太群研究。